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邻位连接技术(pla)伯远生物邻位连接技术(pla)

邻近连接技术（PLA）是一种高灵敏度、高特异性的蛋白质检测技术，可在单分子水平原位分析蛋白质互作或翻译后修饰。其核心原理是：当两个目标蛋白（或修饰位点）间距<40 nm时，偶联特异性抗体的PLUS/MINUS DNA探针会相互靠近，经连接酶催化形成环状DNA模板，再通过滚环扩增（RCA）添加荧光信号。该技术广泛应用于信号通路研究、疾病诊断等领域，尤其适合FFPE组织样本和临床微量检测。

公司简介

我司是国家级专精特新小巨人企业，国家级重点实验室，牵头多项省部级重大专项，公司科研技术人员500+（硕博占比40%以上），作为功能基因研究综合性平台，15年技术沉淀，每年完成功能基因研究数量50000+，长期服务课题组10000+（含协和、同济、华西、湘雅、中山、军事医学院等顶尖医学研究机构），各类仪器设备投资超1个亿

案例展示

我司案例

细胞样本蛋白A和蛋白B强互作检测

细胞样本蛋白A和蛋白B弱互作检测

细胞样本蛋白A和蛋白B互作线粒体定位

组织切片样本蛋白A和蛋白B互作检测

参考文献

Wang S, Yoo S H, Kim H, et al. Detection of in situ protein-protein complexes at the Drosophila larval neuromuscular junction using proximity ligation assay[J].Journal of visualized experiments: JoVE, 2015 (95): 52139.

背景说明

背景说明

邻近连接技术（Proximity Ligation Assay，PLA）是一种基于抗体识别与DNA扩增的高灵敏度蛋白质检测技术，其核心原理是通过空间邻近依赖的DNA连接与扩增，将蛋白质相互作用或翻译后修饰事件转化为可定量的荧光信号。具体原理可分为以下关键步骤：

（1）双抗体识别：使用一对特异性抗体（分别针对目标蛋白A和B，或同一蛋白的不同修饰位点），抗体分别偶联一条独特的单链DNA探针（PLUS和MINUS探针）。当两个靶标在空间上邻近（< 40 nm）时，其携带的DNA探针末端得以靠近；

（2）DNA连接与环化：探针末端的互补序列在连接酶催化下共价结合，形成闭环DNA模板。这一步骤具有高度特异性，当两靶标真实互作时才会触发。

（3）信号放大与检测：闭环DNA通过滚环扩增（RCA）生成包含数百重复单元的DNA产物，再与荧光标记或酶标探针杂交，形成离散的荧光信号点（每点代表单个互作事件）。这种指数级信号放大使PLA可检测单分子水平的目标蛋白。