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HT-29 是结直肠癌研究里的“明星株”之一，应用极广，从 3D 培养、高通量筛选到毒理学、转染宿主都能见到它。它有个特点是成簇生长、贴壁较慢，新手容易被“怎么长不满”“怎么一堆漂浮”搞懵。

HT-29 是人结肠癌细胞，1964 年由 J. Fogh 从一名 44 岁白人女性结肠直肠癌患者的原发肿瘤中用移植培养法分离。它合成 IgA、CEA、TGFβ 结合蛋白和黏液素，c-myc、K-ras、H-ras 等癌基因阳性，p53 密码子 273 有 G→A 突变。广泛用于 3D 培养、高通量筛选、癌症和毒理学研究，也是常用转染宿主。

细胞背景与来源

来源：人，结肠直肠癌原发肿瘤。贴壁生长，成簇生长，胞体黑点较多（正常现象）。

应用场景与研究价值

• 肿瘤学：结直肠癌发生、耐药、癌基因/抑癌基因研究。
• 肠道功能：黏液素分泌、肠道屏障、IgA 相关研究。
• 3D/高通量/毒理：3D 培养、药物高通量筛选、毒理学评价、转染宿主。

培养特性与注意事项

培养基：McCoy's 5a + 10% FBS + 1% 双抗。环境 37℃、5% CO2、饱和湿度。贴壁、成簇生长，很难长满，汇合到 80% 就传代。

传代：PBS 润洗后用 0.25% 含 EDTA 胰酶，37℃ 消化到细胞触角收回、部分脱落（约 1-2 min）再终止，成簇的要轻轻吹散；900 rpm 离心 3-5 min。换液 2-3 天一次。

冻存：程序性冻存液，程序降温盒 -80℃ 过夜转液氮。复苏：37℃ 水浴至米粒冰块，150g 离心 1-2 min。生物安全：BSL-1，人源细胞建议按 BSL-2 防护操作。

注意：复苏恢复慢（约一周），期间漂浮细胞多，换液时要离心收集接回；贴壁慢，建议 48 h 后再换液处理。

HT-29 成簇生长、贴壁慢，用验证过的体系能少折腾。尚恩生物（SUNNCELL）有 HT-29 现货（货号 SNL-069），配套专用培养基和 0.25% 含 EDTA 胰酶（货号 SNT-002），细胞 STR 鉴定齐全，技术支持可指导消化。