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重组人血管内皮生长因子 165（Human VEGF165 Protein）属于 VEGF‑A 主要剪接亚型，成熟蛋白由 165 个氨基酸组成，预测分子量 19 kDa，大肠杆菌无标签表达。该蛋白依靠二硫键形成同源二聚体发挥生物学活性，区别于 VEGF121，VEGF165 拥有完整的肝素结合结构域，既可以游离存在于液相环境，也能够结合基质当中的硫酸乙酰肝素，模拟生理条件下配体被胞外基质滞留储存的状态；结合 VEGFR‑1、VEGFR‑2 受体，激活 ERK、PI3K‑Akt 信号通路，调控内皮细胞增殖、迁移，是三维血管类器官、小管形成模型中使用最广泛的工具因子。Cykine 赛因生物这款无标签 VEGF165 蛋白 SDS‑PAGE 纯度＞98%，内毒素＜1 EU/μg，采用 HUVEC‑SV40 细胞增殖实验完成活性标定，适配多类人源体外基础科研。

一、人VEGF165 分子与信号调控特点

VEGF165 必须组装为同源二聚体，才能够诱导 VEGFR 受体二聚化与自磷酸化，进而启动下游信号网络。ERK 通路主要驱动内皮细胞周期运转与增殖；PI3K‑Akt 通路提升细胞存活能力，降低细胞凋亡水平。肝素结合结构域是 VEGF165 最核心的结构特征，该区域可与肝素、基质糖胺聚糖相互作用，一部分配体被锚定在基质当中，形成局部信号储备库，这种特性和 VEGF121 的自由扩散模式形成鲜明对比，两个亚型不可互相替代。 本产品为 Tag‑free 无标签设计，无额外氨基酸干扰二聚体组装和受体识别，ED₅₀为 0.63 ng/mL，比活性＞1.59×10⁶ IU/mg。严格的内毒素控制，适配人原代内皮细胞等高敏感体系。物种上不同来源 VEGF 对人源受体亲和力存在差异，人源正式课题优先选择人 VEGF165，啮齿类同源蛋白仅适合预实验条件摸索。

二、重组人 VEGF165 核心体外科研应用场景

第一，人源内皮细胞体外功能研究。用于 HUVEC 等内皮细胞增殖、划痕迁移实验，探究内皮细胞运动、存活调控规律。由于具备肝素结合位点，在含有肝素或者基质成分的培养环境下，信号作用模式更贴近生理配体行为。 第二，体外三维小管形成与血管类器官培养。VEGF165 是基质胶小管形成实验、血管类器官的经典添加因子，模拟基质锚定型配体的作用模式，用于解析血管组装、分支出芽的调控机制。 第三，多能干细胞向内皮谱系定向诱导。在人 iPSC、ESC 向血管内皮细胞分化体系中，VEGF165 常作为核心诱导因子，协同其他细胞因子，推动内皮谱系细胞生成，用于发育生物学相关体外探究。 第四，VEGFR 信号通路科研参照工具。可作为 WB 磷酸化检测、细胞功能实验的阳性刺激对照，评价 VEGFR 中和分子、候选调控小分子的体外功能效果。

三、科研实验关键提示

VEGF165 存在明显剂量依赖性；同时肝素、基质组分能够结合并富集 VEGF165，因此二维无基质体系与三维基质包裹体系的最优工作浓度差异较大，不能直接照搬 VEGF121 文献参数，正式实验务必设置浓度梯度预实验。蛋白二聚体对反复冻融、剧烈震荡敏感，多次冻融会造成二聚体解离，活性下降。

VEGF165 凭借独有的肝素结合特性，可以更好复刻基质锚定型配体生物学行为，是血管发育、内皮细胞生物学方向基础科研不可或缺的工具。Cykine 赛因生物落实纯度、内毒素、细胞增殖活性多重质控，为人源血管相关体外基础科研，提供性能稳定的重组蛋白产品。